位相差顕微鏡法

位相差顕微鏡は、子宮頸管粘液 (頸管粘液) および膣分泌物 (膣液) の重要な細胞の検査を非常に容易にする、婦人科で不可欠な診断手順です。 さらに、この手順により、次の評価も可能になります。 精子 (精液細胞)。

適応症(適用分野)

  • の診断 膣内細菌叢 – 膣内細菌叢 (膣内細菌叢) を検査する場合、位相差顕微鏡によって次の検査が可能です: たとえば、細菌の定着の欠如または正常な膣内細菌叢 (乳酸 細菌)細胞溶解(細胞破壊)の有無にかかわらず、この診断手順の助けを借りて行うことができます。 さらに、 細菌 準備段階で、それらを不動菌と運動菌のグループに分類します。 さらに、通常、寄生虫のグループに属する膣トリコモナスなどの鞭毛虫は、位相差顕微鏡で確実に検出できます。 さらに、真菌症(真菌症) 位相差顕微鏡で確実に検出できるため、位相差顕微鏡を使用してツグミ真菌症の診断を行うことができます。 これらの診断能力に基づいて、不妊症の感染性子宮頸部原因の検出は通常可能です。
  • 炎症マーカー – 位相差顕微鏡による、炎症の数と種類 白血球 (白血球の形態) を決定することができます。
  • 周期段階の決定 – 膣細胞診は、月経周期の周期段階を決定するために使用されます。 この検査ステップでは、膣(膣)の表層(表面)細胞を顕微鏡で検査します。 細胞評価は、女性の現在の月経周期に関する情報を提供します.女性の周期はXNUMXつの段階に分けられます.黄体期)。 ただし、位相差顕微鏡による周期段階の決定は、現在、ホルモン診断に大きく取って代わられ、高度な診断の確実性が保証されていることに注意してください。
  • Sims-Huhner テスト – このテスト手順は、性交後テストとも呼ばれ、 精子 (精子)は、子宮頸管粘液(頸管粘液)に浸透して受精部位に到達することができます。
  • の評価 精子 – 精子が子宮頸管粘液に浸透する (通過する) 能力を評価することに加えて、位相差顕微鏡は、精子の数、運動性、および形態 (外観) をさらに調べることができます。
  • 塗抹検査 – 真菌症 (真菌性疾患) などの疑いがある場合、膣 (膣) または外陰 (女性の外部の主要な性器全体) の塗抹標本の可能性があります。 およびクリトリス)またはおそらく肛門領域から採取し、顕微鏡的に評価します。

存在する膣分泌物の評価の例を使用した位相差顕微鏡の準備:

  • 位相差顕微鏡による膣分泌物の評価の開始時に、XNUMX つの適切な天然の標本 (新鮮な、固定されていない、通常は無染色の標本) の準備 体液、生きた病原体の顕微鏡的検出のための組織または器官の内容物)を作成する必要があります。
  • 添加 カリウム 膣分泌物への水酸化溶液(KOH)と食塩が行われます。 混合が完了したら、合わせた分泌物をスライドに塗布し、カバースリップで覆います。 その後、位相差顕微鏡による評価を行うことができます。

手順

位相差顕微鏡の原理は、顕微鏡のビーム経路における光線の干渉に基づいており、染色されていない細胞の高コントラストの画像を実現できます。 位相差顕微鏡の構造と機能:

  • 環状アパーチャ、コンデンサー、環状位相板、および対物レンズは、位相差顕微鏡の機能にとって特に重要です。 環状アパーチャをコンデンサーに挿入し、位相板を対物レンズに挿入することにより、非回折光ビームと回折光ビームが分離されます。その結果、回折光の波長が遅延することで位相差が生じ、構造の詳細が光学的に作成されます。検査対象の微小物体の色は、周囲の媒体よりも暗く見えます。 物理的には、位相 血小板 位相差または経路差を振幅差に変換します。 これらの振幅の違いの結果として、対象物を通過して対象物で回折された直接光線の相互キャンセルまたは増幅によって、対象物の画像が顕微鏡に表示されます。
  • したがって、この原理の欠点は、振幅効果が通常位相効果に重ねられるため、理想的な位相準備が原則ではないということです。
  • 振幅の違いによって構造を画像化するという原理に基づいて、既存の細胞構造は、それ自体の光学的性質に応じて、グレーの階調として表されます 密度. 構造の再現を改善するために、薄い準備と相の使用 血小板 が示されています。 さまざまなフェーズの性質に応じて 血小板、正と負の両方の位相コントラストを実現でき、対象のオブジェクトを周囲よりも暗くしたり明るくしたりできます。
  • 位相差顕微鏡検査では、次のことに注意することも重要です。 壊死 (細胞の死) は、光への暴露と重要な細胞への追加の損傷により、比較的迅速に起こります。 この急速な結果として 壊死 開発では、スライドの評価を XNUMX ~ XNUMX 時間以内に実行する必要があります。 有効 診断手段の。 したがって、重要な標本の評価に関するこの時間制限は、通常、顕微鏡写真による文書化、または必要に応じてマイクロキネマトグラフィーを実行することによって文書化する必要があります。 顕微鏡写真は、顕微鏡に取り付けたカメラで撮影した顕微鏡画像の写真です。 マイクロキネマトグラフィーにより、顕微鏡観察下にある対象物を動画で捉える可能性があります。

位相差顕微鏡の利点:

  • 即時診断 – 時間を節約し、安価に実行できます。
  • 比較的簡単に実行できるため、すぐに教えたり学習したりできます。
  • 研究者の経験に応じて、比較的良好な感度 (手順の適用によって病気が検出された病気の患者の割合、つまり陽性の結果が生じる) と特異度 (実際に健康な人が病気にかかっていない確率)問題の病気は、手順によって健康であると検出されます)
  • 診断は、外部の支援なしで (つまり、サードパーティの研究所なしで) 実行可能です。