シングル-遺伝子 分析は、対象を絞った遺伝子検査法です。
この手順の枠内で、遺伝性疾患が疑われる場合、これは、 遺伝子、原因と思われる遺伝子を調べます。 これはまた、スクリーニング検査の一部として日常的に行われることもよくあります。
適応症（適用分野）
- 単一遺伝子疾患の診断例： 嚢胞性線維症.
手順
必要な材料
- ヘパリン血液（最低1〜2ml）
患者の準備
- 必要はありません
破壊的要因
- 知られていない
実験方法
ほとんどの場合、シングルで使用されるシーケンス方法-遺伝子 分析は、チェーンターミネーション合成とも呼ばれるサンガー法であり、最初にDNAを分離します。 血。 その後、すべて 水素化 二本鎖DNAを一緒に保持するのに役立つ結合が切断されます。 94〜96°Cで60分間加熱した後、XNUMX本の一本鎖が存在します。 次に、いわゆるプライマーハイブリダイゼーションが起こり、それによってプライマーが付着する。 これは約XNUMX°Cで行われます。 プライマーは、DNA複製の開始点として機能するオリゴヌクレオチド（数ヌクレオチドで構成されるオリゴマー）です。 酵素 DNAポリメラーゼなど。 プライマーハイブリダイゼーション後、伸長が起こり、温度が72°Cに上昇します。 これにより、プライマーをDNAポリメラーゼに結合させることができます（酵素 DNAを合成する）。 平均30サイクル後、手順を停止できます。
さらなる分析はによって実行されます 毛細血管 自動シーケンサーでの電気泳動。 結果はエレクトロフェログラムと呼ばれます。 これは、基本配列を示すさまざまな色を示しています。
この方法により、点突然変異としても知られる、遺伝子内の単一の核酸塩基のみが関与する突然変異を検出することができます。
