インサイチュハイブリダイゼーションは、染色体異常を検出するための方法です。 特定のラベル付けが含まれます 染色体 ふわふわと 染料 そしてそれらをDNAプローブに結合します。 この技術は、遺伝子変異の出生前診断に使用されます。
insituハイブリダイゼーションとは何ですか？
インサイチュハイブリダイゼーションは、特異的な標識を含む 染色体 ふわふわと 染料 そしてそれらをDNAプローブに結合します。 この技術は、出生前診断に使用されます 遺伝子 突然変異。 インサイチュハイブリダイゼーションまたは 蛍光in situハイブリダイゼーション の分子遺伝学的検出を含む 核酸 特定の組織または細胞のRNAまたはDNAから。 通常、このタイプの診断は、染色体異常の構造的または数値的異常を検出するために使用されます。 妊娠。 この目的のために、それ自体が核酸からなる人工的に生成されたプローブが使用されます。 次に、にバインドします 核酸 塩基対形成による生物の中で。 この結合は、ハイブリダイゼーションという用語で呼ばれます。 検出は患者の生体構造に対して行われるため、その場での検出に対応します。 これと区別されるのは、試験管内で検出が行われるinvitro法です。 この方法は、科学者のジョー・ガルとメアリー・ルー・パルデュによって20世紀に開発されました。 それ以来、技術は進化してきました。 例えば、放射性プローブが使用されたが、ラベリングに共有結合を有する蛍光標識プローブ 今日使用されています。
機能、効果、およびターゲット
インサイチュハイブリダイゼーションは通常、核型では検出できない染色体異常である染色体異常を検出するために使用されます。 したがって、この方法は、遺伝性疾患が 妊娠。 染色体異常は今日過小評価されるべきではない問題であるため、この方法の適用は時間とともに増加しています。 ハイブリダイゼーションは、母親のネイティブ細胞を使用して実行されます 羊水。 この技術の基本は、色標識されたプローブのDNAフラグメントへの結合です。 バインディングのおかげで、個々のコピーが光信号を発し、顕微鏡下で見えるようになるため、後で顕微鏡を使用してコピー数を評価することができます。 これにはさまざまな手順があります。 どちらの分析も、結合の直後に行われます。 この場合、次のような蛍光染料 ビオチン DNAプローブに直接結合するが使用されます。 インサイチュハイブリダイゼーションの間接法では、蛍光物質はハイブリダイゼーション後にのみプローブに結合できるため、ハイブリダイゼーションの直後に分析を行うことはできません。 この間接法は、感度が高いと考えられるため、直接法よりも一般的に使用されます。 技術には、染色体特異的セントロメーターDNAプローブ、遺伝子座特異的DNAプローブ、染色体特異的DNAライブラリープローブ、および比較ゲノムハイブリダイゼーションが含まれます。 染色体特異的セントロメアDNAプローブは、染色体の数値異常を検出するために使用できます。 つまり、これらは主に複製または削除されたときに使用されます 染色体 疑われています。 遺伝子座特異的DNAプローブは、主に核型では検出できない最小限の変異の検出に適しています。 染色体特異的DNAライブラリープローブは、特に挿入と転座を検出するために使用されます。 一方、比較ゲノムハイブリダイゼーションは、染色体物質の損失と増加の包括的な分析です。 今日、insituハイブリダイゼーションはさまざまな染色体変異の診断において非常に重要です。 の診断で ダウン症候群たとえば、プローブは21番染色体に結合します。この目的のために、通常、染色体特異的プローブが使用されます。これは、この病気の疑いがある場合に適用できます。 疑惑が生じる可能性があります。たとえば、両親が以前にこの病気の子供を出産したことがあり、 超音波 画像が目立ちます。 ダブルタイではなくトリプルタイがあり、結果としてトリプルカラー信号が発生した場合、診断は確定したと見なされます。
リスク、副作用、および危険
たとえば、PCRとは異なり、insituハイブリダイゼーションは汚染の影響を受けにくいです。 さらに、手順に必要な時間は非常に短いですが、特に胚は染色体パターンを形成するため、存在するパターンを使用して残りの染色体を確実に推測することはできません ディストリビューション したがって、他の細胞の遺伝的状態。 カラー信号は、他の理由でオーバーラップしたり、見えないままになる場合もあります。 したがって、診断ツールとしてのinsituハイブリダイゼーション 妊娠 比較的エラーが発生しやすいです。 誤診が発生する可能性があり、両親は健康に反対することを決定する可能性があります 胚。 インサイチュハイブリダイゼーションのエラー傾向を減らすために、少なくともXNUMXつの胚性細胞を同時に検査する必要があります。 XNUMXつのセルを並行して検査することにより、誤診のリスクはごくわずかになりました。 したがって、そのような場合、親は診断に頼ることができます。 インサイチュハイブリダイゼーションは、すべての妊婦に提供されるわけではなく、リスクグループの女性にのみ提供されます。 それにもかかわらず、妊娠中の女性は彼ら自身の要求でこのタイプの診断を否定されません。 異常な 超音波 所見または異常な血清は、医師に診断手順を提供するように促す場合があります。 今日、insituハイブリダイゼーションは染色体異常の大部分を診断するために使用できますが、すべてではありません。 したがって、insituハイブリダイゼーションは決して単独で実行してはならず、常に従来の染色体検査と組み合わせて使用する必要があります。 妊娠中の女性の世話は、この手順で主要な役割を果たします。 したがって、分析の前に、診断方法についての徹底的な議論が妊婦と行われ、技術のリスク、可能性、および限界について彼女に知らせます。
